Etap III
Optymalizacja formowania cebul śnieżycy letniej i biosyntezy alkaloidów Amaryllidaceae, aklimatyzacja: wpływ poliamin – badania przemysłowe (UR)
Formowanie cebul śnieżycy letniej (bioreaktor Rita®, 12 tygodni)
Formowanie cebul śnieżycy letniej na pożywce (a) kontrolnej oraz wzbogaconej w poliaminy: (b) putrescynę 5 µM, (c) putrescynę 50 µM, (d) putrescynę 100 µM, (e) sperminę 5 µM,(f) sperminę 50 µM, (g) sperminę 100 µM, (h) spermidynę 5 µM, (i) spermidynę 50 µM i (j) spermidynę 100 µM.
Chłodzenie roślin śnieżycy letniej (pożywka stała, temperatura 5 °C, 4 tygodnie)
Komora chłodnicza
Cebule śnieżycy letniej uformowane na pożywkach zawierających 50 µM: (a) putrescyny, (b) sperminy, (c) spermidyny.
Aklimatyzacja śnieżycy letniej (komora fitotronowa, 25 °C)
Rośliny śnieżycy letniej otrzymane w warunkach in vitro
Rośliny śnieżycy letniej otrzymane w warunkach in vitro
Przeprowadzone obserwacje
- ocena morfologiczna roślin,
- analizy biochemiczne: analiza zawartości chlorofilu a i b oraz karotenoidów, cukrów, analiza aktywności enzymów antyoksydacyjnych: katalazy (CAT), dysmutazy ponadtlenkowej (SOD) i peroksydazy (POD),
- analizy fitochemiczne: określenie zawartość galantaminy i likoryny, endogennych poliamin, kwasu abscysynowego (ABA), kwasu indolilio-3-octowego (IAA), giberelin,
- analizy aktywności fotochemicznej fotosystemu II (PSII).
Wnioski
- Poliaminy wpływają pozytywnie na wzrost roślin śnieżycy letniej w warunkach in vitro.
- Traktowanie roślin poliaminami, a następnie ich chłodzenie przez 4 tygodnie w temperaturze 5 °C stymuluje biosyntezę galantaminy i likoryny.
- Wzbogacenie pożywki w 100 µM spermidyny skutkuje najwyższą aktywnością katalazy
i dysmutazy ponadtlenkowej oraz wysoką zawartością cukrów rozpuszczalnych w roślinach. - Rośliny śnieżycy letniej charakteryzują się zdolnością do biosyntezy putrescyny, kadaweryny, sperminy, spermidyny, ABA oraz IAA w zależności od zastosowanych poliamin.
- Wzrost roślin na pożywkach wzbogaconych w poliaminy wyraźnie wpływa następczo na funkcjonowanie aparatu fotosyntetycznego roślin podczas aklimatyzacji.