Etap I
Optymalizacja wzrostu roślin śnieżycy letniej i biosyntezy alkaloidów Amaryllidaceae: wpływ temperatury – badania przemysłowe (UR)
Doświadczenia w warunkach in vitro
Cel: ustalenie optymalnej temperatury do wzrostu i rozwoju roślin śnieżycy letniej
Prace laboratoryjne
Przygotowanie pożywki
Sterylizacja narzędzi
Pasażowanie kultur
Wyniki
Wzrost roślin w komorach klimatycznych w temperaturze a. 15 oC, b. 20 oC, c. 25 oC, d. 30 oC
Oznaczenie zawartości barwników fotosyntetycznie czynnych: chlorofilu a i b oraz karotenoidów metodą spektrofotometryczną
Cel: ocena jakości otrzymanych roślin śnieżycy letniej
Tabela 1. Wpływ temperatury na zawartość chlorofilu a, chlorofilu b i karotenoidów w liściach śnieżycy letniej
Temperatura |
Stężenie chlorofilu a [µg/g ś.m.] |
Stężenie chlorofilu b [µg/g ś.m.] |
Stężenie karotenoidów [µg/g ś.m.] |
---|---|---|---|
15 °C |
38,76 ± 4,60 a |
26,35 ± 2,46 a |
13,06 ± 2,22 a |
20 °C |
44,33 ± 4,88 a |
27,29 ± 2,82 a |
12,55 ± 1,80 a |
25 °C |
38,10 ± 4,53 a |
26,88 ± 2,73 a |
9,86 ± 1,24 a |
30 °C |
31,19 ± 2,80 a |
21,08 ± 1,97 a |
8,46 ± 1,73 a |
średnie oznaczone tymi samymi literami nie różnią się między sobą istotnie
przy p=0,05 wg testu Duncana (n=5 ± błąd standardowy), ś.m.: świeża masa
Wnioski
Analiza ekspresji genów związanych z biosyntezą alkaloidów w roślinach śnieżycy letniej
Wnioski:
Temperatura wzrostu roślin śnieżycy letniej wpływa na ekspresję genów zaangażowanych w szlak biosyntezy alkaloidów Amaryllidaceae.
Izolacja kwasów nukleinowych
Izolacja kwasów nukleinowych
Analizy RT-PCT i Real-time PCR
Oznaczenie zawartości galantaminy i likoryny
ucieranie zliofilizowanej tkanki
ekstrakcja oraz oczyszczanie ekstraktów
odparowywanie ekstraktów
Wyniki